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设计敲除某个酶的细胞系然后跑WB可以检测该酶的底物

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发表于 2016-10-29 23:24:54 | 显示全部楼层 |阅读模式
设计好敲除了某个酶的基因的细胞系可以用来做substrate discovery比如CARM1是一个酶,那么WT细胞系和KO细胞系里面就可以用α-ADMA来做WB,如下图:


如果一个蛋白在WT显现了,在KO没有条带,那么CARM1就是它的唯一催化酶
如果一个蛋白在WT和KO都有带,颜色还差不多,说明CARM1不是它的唯一催化酶
如果它在两个细胞系都不能显示带,说明它其实是被α-ADMA通过结合CARM1底物来间接的抓取下来的。

参考文献:CARM1 Methylates Chromatin Remodeling Factor BAF155 to Enhance Tumor Progression and Metastasis  

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发表于 2016-11-9 11:08:48 | 显示全部楼层
厉害了,好文章。
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